發(fā)光劑是指在發(fā)光反響中介入能量轉(zhuǎn)移并以發(fā)射光子的情勢(shì)產(chǎn)生能量的化合物，依據(jù)發(fā)光特色分為化學(xué)發(fā)光劑、生物發(fā)光劑和熒光素3種。物資由電子激起態(tài)到基態(tài)，產(chǎn)生的能量稱為發(fā)光，表示為光的發(fā)射。依據(jù)構(gòu)成激起態(tài)份子的激起能可將發(fā)光分為:化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光和光照發(fā)光。

電化學(xué)發(fā)光劑是指在電*外面舉行電化學(xué)反響而收回光的物資。電子供體3丙胺和3聯(lián)吡啶釕在陽性電*外面成為強(qiáng)氧化劑，可將2價(jià)變成3價(jià)，丟失1個(gè)電子產(chǎn)生氧化反響。電子失去后被氧化成陽離子自由基，可自覺地丟失質(zhì)子，成為很強(qiáng)的復(fù)原劑，很不穩(wěn)固。可將1個(gè)高能量的電子遞給3價(jià)的使其構(gòu)成激起態(tài)的2價(jià)。激起態(tài)的3聯(lián)吡啶釕不穩(wěn)固，很快發(fā)射出1個(gè)光子，到基態(tài)的3聯(lián)吡啶釕。這個(gè)進(jìn)程可在電*外面循環(huán)往復(fù)地舉行，發(fā)生很多光子。 直接化學(xué)發(fā)光劑只需轉(zhuǎn)變?nèi)芤旱膒H值等前提就可以發(fā)光的物資，不需酶的催化感化。如吖啶酯在有過氧化氫的稀堿溶液中即能發(fā)光。

經(jīng)常使用的酶發(fā)光劑有酶促反響的發(fā)光底物。是指經(jīng)酶的降解感化而收回光的發(fā)光底物，化學(xué)發(fā)光酶免疫技巧中經(jīng)常使用的酶有堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶。為對(duì)-羥基苯乙酸和魯米諾或其衍生物以及4-（2-螺旋金剛烷⑷-甲氧基⑷-甲基⑷-（4-磷酸氧基）-苯基⑴，2-2氧乙烷和4-甲基傘形酮磷酸鹽。對(duì)-羥基苯乙酸可用熒光光度計(jì)丈量。魯米諾的氧化反響在堿性緩沖液中舉行，平日以緩沖液作底物液。要留意是:起首,魯米諾和H2O2在無HRP催化時(shí)也能遲緩自覺發(fā)光，而在末了光強(qiáng)度測(cè)定中形成空缺滋擾，因此宜分離配制成2瓶試劑溶液，只在用前混雜;其次, 如鄰－碘酚試劑或熒光素酶可加強(qiáng)催化魯米諾氧化的反響和延伸發(fā)光時(shí)光，進(jìn)步發(fā)光敏感度。