1.范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定,第二法不適用于含有被包埋脂肪酸的測定。

2.規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

**法 乙酰氯一甲醇甲酯化法

3.原理

乙酰氯與甲醇反應(yīng)得到的鹽酸_—甲醇使試樣中的脂肪和游離脂肪酸甲酯化,用甲苯提取后,經(jīng)氣相色譜儀分離檢測,外標(biāo)法定量。

4.試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格,水為GB/T 6682規(guī)定的一級水。

4.1 無水碳酸鈉。

4.2 甲苯:色譜純。

4.3 乙酰氯

4.4 乙酰氯甲醇溶液(體積分?jǐn)?shù)為10%):量取40mL甲醇于100mL干燥的燒杯中,準(zhǔn)確吸取50mL乙酰氯(4.3)逐滴緩慢加入,不斷攪拌,冷卻后轉(zhuǎn)移并定容至50mL干燥的容量瓶中。臨用前配制。

注:乙酰氯為刺激性試劑,配制乙酰氯甲醇溶液時應(yīng)不斷攪拌防止噴濺,注意防護(hù)。

4.5 碳酸鈉溶液:準(zhǔn)確稱取6g無水碳酸鈉(4.1)于100mL燒杯中,加水溶解,轉(zhuǎn)移并用水定容至100mL容量瓶中。

4.6 脂肪酸甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99%,脂肪酸種類參見附錄A中的表A.1。

4.7 脂肪酸甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)工作液:按試樣中各脂肪酸含量及所要分析脂肪酸的種類配制適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液,用甲苯定容并分別保存于-10℃以下的冰箱中,有效期三個月。

5.儀器和設(shè)備

5.1 天平:感量為0.01g和0.1mg。

5.2 恒溫?zé)崴〔邸?/p>

5.3 離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥5000轉(zhuǎn)/分鐘。

5.4 氣相色譜儀,帶FID檢測器。

5.5 冷凍干燥儀。

5.6 氮吹儀。

5.7 螺口玻璃管(帶有聚四氟乙烯做內(nèi)墊的螺口蓋):15mL。

5.8 離心管:50mL。

6.分析步驟

6.1 試樣處理

6.1.1 試樣含水量大于5%時,冷凍干燥至含水量小于5%。

6.1.2 稱取試樣0.5g(精確到0.1mg)于15mL干燥螺口玻璃管(5.7)中,加入5.0mL甲苯(4.2)。

6.1.3 稱取無水奶油試樣0.2g(精確到0.1mg)于15mL干燥螺口玻璃管(5.7)中,加入5.0mL甲苯(4.2)。

6.2 甲酯化提取

6.2.1 試樣測定液的制備

在試樣(6.1.2或6.1.3)中加入10%乙酰氯甲醇溶液60mL(4.4),充氮氣后,旋緊螺旋蓋,振蕩混合后于80℃±1℃水浴中放置2h,期間每隔20min取出振搖一次,水浴后取出冷卻至室溫。將反應(yīng)后的樣液轉(zhuǎn)移至50mL離心管中,分別用3.0mL碳酸鈉溶液(4.5)清洗玻璃管三次,合并碳酸鈉溶液(4.5)于50mL離心管(5.8)中,混勻,5000轉(zhuǎn)/分鐘離心約5min。取上清液作為試液,氣相色譜儀測定。

6.2.2 標(biāo)準(zhǔn)測定液的制備

準(zhǔn)確吸取脂肪酸甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)工作液(4.7)0.5mL于15mL螺口玻璃管(5.1)中,加入4.5mL甲苯,其他操作步驟同6.2.1。

6.3 色譜參考條件

色譜柱:固定液****二氰丙基聚硅氧烷,100m×0.25mm,0.20μm,或性能相當(dāng)?shù)纳V柱。

載氣:氮氣。

載氣流速:1.0mL/min。

進(jìn)樣口溫度:260℃。

分流比:30:1。

檢測器溫度:280℃。

柱溫箱溫度:初始溫度140℃,保持5min,以4℃/min升溫至240℃,保持15min。

進(jìn)樣量:1.0μL。

6.4 試樣溶液的測定

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下載地址：《GB 5413.27-2010 嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定》