檢驗方法一般有以下三種：薄層色譜法（TLC），氣相色譜及質譜聯用法（GC-MSD）及高效液相色譜法（HPLC）。標準規定被檢產品中不得含有23種偶氮染料中間體，若檢出其中一種即為不合格產品，其限量為30ppm。

以橙色錦綸面料試樣為試驗對象進行檢測定性和定量分析。
 

2.主要儀器

CP224S電子天平；HD500恒溫水浴振蕩器；美國organomation氮吹儀；瑞士BUCHI旋轉蒸發儀；TGL-16B離心機；安捷倫7890A-5975C氣質聯用儀。

叔丁基甲醚（TEDIA HPLC）；乙腈（TEDIA HPLC）；連二亞硫酸鈉（國藥 AR）；偶氮混標（北京振翔 100ppm）；硅藻土柱子（Agela）；巴氏吸管；1.5mL離心管。

紡織品在檸檬酸鹽緩沖溶液介質中用連二亞硫酸鈉溶液還原分解，用叔丁基甲醚通過硅藻土柱提取溶液中的芳香胺，濃縮后用乙腈定容，*后用GC-MS分析樣品。

由于檢出苯胺，新取樣品在堿性介質中用連二亞硫酸鈉還原，用叔丁基甲醚提取可能分解出的4-氨基偶氮苯，用GC-MS進行定性分析。

5.1取樣，取代表性試樣，剪成5mm×5mm 的小片，混合。從混合試樣中稱取1.00g樣品，精確到0.01g，放入定制的反應器中。

5.2還原，向反應器中加入已預熱至（70±2）℃的檸檬酸鹽緩沖溶液17mL，密閉，振搖后置于（70±2）℃恒溫水浴振蕩器保溫30min，然后打開反應器，加入新鮮配制的200mg/L濃度的連二亞硫酸鈉溶液3mL，并立即密閉振搖后再于（70±2）℃恒溫水浴振蕩器保溫30min，取出后2min內冷卻到室溫。

5.3萃取，冷卻后迅速用玻璃棒將反應液全部倒入硅藻土柱中，任其吸附15min，再用4×20mL叔丁基甲醚分四次洗脫，收集叔丁基甲醚提取液于圓底燒瓶中。

5.4濃縮，將收集到提取液的圓底燒瓶置于旋轉蒸發儀上，于40-50℃溫度，400-500mbar壓力下濃縮至1mL左右，再用氮吹儀吹至近干，后用1mL乙腈定容。超聲溶解后，用巴氏吸管移至1.5mL離心管內，于9000轉/分離心3min。
 

旋轉蒸發

氮吹

離心

5.5進樣，用安捷倫7890A-5975C氣質聯用儀上機分析，進樣量1μL。

5.6初步結果，結果分析中，有苯胺和聯苯胺檢出，需按GB/T 23344-2009進行4-氨基偶氮苯檢測。

5.7 4-AAB檢測過程：從混合試樣中再稱取1.00g樣品，精確到0.01g，放入定制的反應器中，向反應器中加入9.0mL氫氧化鈉溶液，密閉振搖后加入1.0mL連二亞硫酸鈉溶液，再次密閉振搖后置于（40±2）℃的恒溫水浴振蕩器保溫30min，取出后1min內冷卻到室溫。向反應器依次加入10mL叔丁基甲醚和7g氯化鈉，用力振搖后在水浴振蕩器（常溫）中振搖45min。靜置分層后取上層有機相過0.45μm膜后進GC-MS分析。

5.8*終結果：未知樣品含聯苯胺75mg/kg，無4-AAB。 

6.1在做樣品前（或者說單位在準備開展偶氮項目前），需要有方法開發記錄，換句話說，需要用標樣做加標回收等項目，確保方法可行。

6.2采用不同硅藻土柱，對回收率影響很大，*好再換硅藻土柱和使用不同批次硅藻土柱前都做下回收率。

6.3反應器的密閉性對回收率影響也較大，確保反應器密閉性強。

6.4濃縮過程中，旋轉蒸發一定要剩1mL左右，切不可蒸干；氮吹儀需要用緩慢氮氣吹至近干，不可全干，否則也回收率有較大影響。

6.5確保連二亞硫酸鈉有效性，其對結果影響很大。簡單判斷有效性，一種方法是能把非分散染料樣品還原褪色。還有一種方法是配置新鮮是為無色透明溶液，一接觸空氣馬上變黃。

6.6從冷卻到過柱時間要短，時間較長也會對回收率有影響。特別是做4-氨基偶氮苯的時候。

6.7緩沖溶液需按要求，pH要在6.0左右，其pH對回收率也有影響。

6.8做4-氨基偶氮苯的時，加入連二亞硫酸鈉溶液濃度和體積需準確，其對回收率影響較大。

提問：
（1）pH=6.0的檸檬酸鹽緩沖溶液怎么配制？
（2）操作步驟5.2中3mL保險粉溶液用什么工具加入？
（3）操作步驟5.3中是否需要用玻璃棒擠壓樣品使還原后的混合溶液盡量脫離紡織品殘渣流出？
（4）操作步驟5.4中1mL乙腈怎么定容？定容后還離心干嗎？
 

(1)按標準配置：12.526g檸檬酸和6.320g氫氧化鈉溶于1000mL水（不過我用分析純的檸檬酸和氫氧化鈉配置，一般配出來pH在5.5左右，所以氫氧化鈉一般都要多加點，正采購優級純的，下次按標準配置看看是不是6.0左右）

（2）用移液槍或移液管都可以

（3）是的，按國標需要如此。（bs en 14362-1:2012是連同樣品一起倒入硅藻土柱上方）

（4）移液管移取1mL乙腈至圓底燒瓶中，稍微超聲幫助溶解下即可。由于溶解后有時有沉淀，所以離心下（也可以過膜）。