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細胞增殖毒性檢測,酶活性測定

作者:Lance 時間:2022-10-25 來源:互聯網

細胞毒性檢測主要是根據細胞膜通透性發生改變來進行的檢測,常用以下幾種方法:

.MTT,XTT法利用線粒體內部酶的活性,可以將特定的四唑鹽類進行轉化,然后通過酶標儀進行檢測

.LDH(乳酸脫氫酶)的方法通過檢測細胞培養上清中LDH的酶活性,來檢測細胞毒性其它酶方法如檢測上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等

·細胞增殖能力分析試劑盒

原理:正常細胞代謝旺盛,其線粒體內的琥珀酸脫氫酶,可將四唑鹽類物質(如MTT,XTT,WST-1等)還原為紫色的結晶狀的物質,沉積在細胞周圍,然后通過酶標儀讀取OD值,從而檢測到細胞增值狀態

·熒光素發光法-細胞生存能力檢測

原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核細胞的胞漿中,AK(腺苷酸激酶)具有激活ADP(二磷酸腺音)生成ATP(三磷酸腺昔)。當細胞受損后,細胞膜發生破損,AK會釋放到培養上清中。該試劑盒利用熒光素酶和熒光素在ATP作用下可以發光,通過化學發光儀可以定量進行檢測.LDH法-細胞毒性檢測

原理:LDH乳酸脫氫酶)是一種穩定的蛋白質,存在于正常細胞的胞質中,一旦細胞膜受損,LDH即被釋放到細胞外;LDH催化乳酸形成丙酮酸鹽,和INT(四唑鹽類)反應形成紫色的結晶物質。通過檢測細胞培養上清中LDH的活性,可判斷細胞受損的程度

細胞毒性是化學物質(藥物)作用于細胞基本結構和/或生理過程,如細胞膜或細胞骨架結構,細胞的新陳代謝過程,細胞組分或產物的合成、降解或釋放,離子調控及細胞分裂等過程,導致細胞存活、增殖和/或功能的紊亂,所引發的不良反應。按作用機制可分3種類型:

@基本細胞毒性,涉及一種或多種上述結構或功能的改變,作用于所有類型的細胞;

②選擇細胞毒性,存在于某些分化細胞上,主要通過化學物質的生物轉化,與特殊受體結合或特殊的攝入機制所引發;

③細胞特殊功能毒性,對細胞結構和功能損傷輕微,但對整個機體損傷非常嚴重。

GB/T 15440-1995環境中有機污染物遺傳毒性檢測的樣品前處理規范GB/T 27831-2011

化學品遺傳毒性釀酒酵母菌基因突變試驗方法B/T 27832-2011

化學品遺傳毒性釀酒酵母菌有絲分裂重組試驗方法ISO 10993-3-2014

醫療器械的生物評定第3部分遺傳毒性、致癌力和生殖毒性試驗GB/16886.3-2008醫療器械生物學評價

第3部分:遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗SEN ISO 10993-3-2009醫療器械的生物評定遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗

BS EN ISO 10993-3-2014醫療器械生物學評價3部分:測試的遺傳毒性,致痘性和生殖毒性DIN EN ISO 10993-3-2009醫療器械生物學評價

第3部分遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗DIN EN ISO 21427-2-2009水的質量通過微核誘變測量進行遺傳毒性評估

第2部分利用V79細胞系的混合種群法

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