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牛奶中抗生素的檢測

作者:如影隨風 時間:2022-10-26 來源:互聯(lián)網(wǎng)

一、 牛奶中抗生素的種類

β-內(nèi)酰胺類

屬于此類的抗生素的有青霉素類和頭孢霉素類,常用于奶牛等家畜的個體臨床治療,殘留在牛乳中。

四環(huán)素類

常見種類有四環(huán)素、金霉素、土霉素、強力霉素等,是一類廣譜抗生素。

氨基糖苷類

常見種類有慶大霉素、鏈霉素、二氫鏈霉素、新霉素、壯觀霉素等,是常用于家畜的氨基糖苷類抗生素。

氯霉素類

包括以下三種化合物:氯霉素,甲砜霉素,氟甲砜霉素。這類藥物都是嚴格限制使用的獸藥,有些國家禁止使用。

大環(huán)內(nèi)酯類

常見種類有紅霉素、秦樂霉素、林可霉素、螺旋霉素和鹽霉素等。

磺胺類

常見種類有磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺嘧啶等,甲氧芐啶是磺胺增效劑,不單獨使用。

二、抗生素殘留的危害

抗生素的殘留對人體的健康、生態(tài)平衡、奶制品價格及奶制品的國際貿(mào)易均有不同程度的危害

三、牛奶中抗生素檢測方法

1.傳統(tǒng)的微生物檢測法

微生物檢測法出現(xiàn)較早,從出現(xiàn)至今,大大改善了我國抗生素檢測手段的發(fā)展,其測定原理是基于抗生素對微生物的生理機能、代謝具有一定的抑制效果,與臨床應用保持一致,相對而言,其耗費的時間久,且存在著較大的誤差,目前*常應用的是TTC法、戴爾沃檢測(DelvotestSP)法、BY法等。

2.國際通用的檢測法

相對而言,其是國際上應用較早的通用測定方法,也是我國制定的監(jiān)測方法,其原理是:如果牛奶中含有抗生素,則加入菌種(嗜熱鏈球菌)經(jīng)培育2.5-3h后,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發(fā)生還原反應,所以樣品呈無色狀態(tài)。如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色。相對而言,這一方法費用較低,但是耗時,因此應用不算太廣,發(fā)展受到一定的限制。

3.戴爾沃檢測法

該方法出現(xiàn)在荷蘭,其原理主要是利用一種微生物叫嗜熱芽胞菌,其在64℃條件下培養(yǎng)2.5——3h后會產(chǎn)酸,酸引起指示劑BCP(溴甲酚紫)變?yōu)辄S色;若牛奶樣品中不含抗生素,培養(yǎng)后樣品呈黃色,如樣品中含有抗生素,嗜熱芽胞菌生長受到抑制而無法產(chǎn)酸,指示劑將不變色。這一方法操作簡單,實用,容易判斷,結(jié)果可靠,相對費用較低,但是其結(jié)果偶爾會出現(xiàn)假陽性,此方法適用于農(nóng)場、企業(yè)、實驗室及政府監(jiān)測部門。

4.藍黃檢測法

該方法是一種廣譜的微生物抑制法,相對而言,耗時短,可以在短時間內(nèi)檢查出抗生素的殘留情況,只要通過顏色對比既可以得出結(jié)論,通過這一檢測方法得到的檢測結(jié)果存在著一定的誤差,容易造成誤檢,但是耗時短,費用低。

5.現(xiàn)代儀器分析法

這一方法主要是借助現(xiàn)代儀器進行檢測,測定其殘留的抗生素種類,*常用的是色譜法、熒光法、毛細管電泳、色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等。運用不同的理論,采用不同的手段進行檢測,提高檢測的標準,加強檢測的質(zhì)量。相對而言,該方法分離速度快,高效,實現(xiàn)自動化控制,可以檢測出抗生素的具體含量,其結(jié)果更加準確,但待檢樣品需經(jīng)一系列的預處理,繁瑣費時,還必須有相應的價格昂貴的儀器設備。一般在大型實驗室使用,適合于精確測定。

6.生化免疫法

這是近年來隨著新科技的發(fā)展而逐漸發(fā)展起來的,其是以抗原與抗體的特異性與可逆性進行結(jié)合,是一種分析就技術(shù)。基本原理家就是抗原體的競爭性結(jié)合,可分為酶聯(lián)免疫測定法(ELISA)、熒光免疫測定法(FIA)、免疫分析技術(shù)與常規(guī)理化分析技術(shù)聯(lián)用的方法等。幾種方法各有優(yōu)缺點,必須注重其綜合使用,提高檢測的質(zhì)量與準確度。從其實踐的結(jié)果來看,其對抗生素的殘留現(xiàn)狀檢測效果良好,靈敏度*高,達到ng級水平;檢測快速、專一性強。相對而言,此法具有高度的專一性,每檢測一種抗生素就要制備或購買相應的抗原或抗體,導致檢測費用較高。因此生化免疫檢測法不可能取代色譜或光譜等常規(guī)分析方法,只能作為其重要的補充。

7.專一試劑盒法

所謂的專一試劑盒法就是根據(jù)含有芽孢桿菌的瓊脂培養(yǎng)基和PH指示劑在一定的溫度下進行培養(yǎng),一般維持在65℃左右,孢子發(fā)育生長,降低培養(yǎng)基pH值,在pH指示劑的作用下,藍(紫)色變?yōu)榫G-黃色。生鮮牛乳中的抗生素殘留使微生物生長和酸的產(chǎn)生受到抑制,由于沒有酸生成,顏色將不會改變。目前在市場中普遍應用的試劑盒有兩種,ECLIPSE50和ECLIPSE100兩種試劑盒。相對而言,ECLIPSE100的精度高,但是ECLIPSE50的檢測標準與方法以及檢測結(jié)果都更加接近國際的水平,其操作簡單方便,更具靈活性,無需做處理樣品的工作,降低工作的難度,檢測效果質(zhì)量高,費用較低,因此目前其普及度較高。

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