作者:百檢 時(shí)間:2022-11-28 來源:互聯(lián)網(wǎng)
樣品處理
稱取2~3g粉碎均勻的樣品,加水15mL,超聲振蕩5min,取出后加入2mL亞鐵氰化鉀溶液,搖勻,再加入2mL乙酸鋅溶液,搖勻,用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值約為7,用水定容到25~50mL,4 000r/min離心5min,取上清液經(jīng)0.45μm水系濾膜過濾,供高效液相色譜測(cè)定。若樣品中含有較多的脂肪時(shí),可將定容好的樣液轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,加入正己烷10ml,振搖1min,靜置分層,棄去正己烷層,再加入10mL正己烷重復(fù)提取一次,取下層水相置于離心管中,4 000r/min離心5min,取上清液經(jīng)0.45μm水系濾膜過濾,供高效液相色譜測(cè)定。
高效液相色譜檢測(cè)條件的確定
試驗(yàn)方法
1.檢測(cè)波長的選擇
經(jīng)紫外光譜掃描190~400nm波段,得出六種物質(zhì)的*大吸收波長分別為:乙?;前匪徕?安賽蜜)226nm,糖精鈉202nm,阿斯巴甜208nm,苯甲酸226nm,山梨酸257nm,脫氫乙酸230nm、293nm。故選擇205nm作為這六種食品添加劑同時(shí)測(cè)定的波長,在波長205nm下各物質(zhì)靈敏度相近,基質(zhì)干擾少,樣品前處理相對(duì)簡單,可簡化日常工作,縮短檢測(cè)時(shí)間,提高檢測(cè)效率。
2.流動(dòng)相及流動(dòng)相比例的選擇
查閱文獻(xiàn)及現(xiàn)行有效的國家標(biāo)準(zhǔn),在測(cè)定防腐劑和甜味劑時(shí)采用的流動(dòng)相多是甲醇和乙酸銨。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)單獨(dú)選用甲醇與乙酸銨或乙腈與乙酸銨時(shí),六種化合物中的糖精鈉與阿斯巴甜都不能得到良好分離。試驗(yàn)采用甲醇:乙腈:0.01mol/L乙酸銨做流動(dòng)相,發(fā)現(xiàn)三種試劑的不同比例對(duì)分離度、峰形、靈敏度影響較大。有機(jī)相含量低時(shí),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)出峰時(shí)間長;有機(jī)相含量高時(shí),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)出峰時(shí)間縮短。選用0.01mol/L乙酸銨與甲醇、乙腈比例為(95:1:4)、(94:2:4)、(93:3:4)的流動(dòng)相進(jìn)行等度試驗(yàn),結(jié)果表明,當(dāng)0.01mol/L乙酸銨與甲醇、乙腈的比例為93:3:4時(shí),各待測(cè)物質(zhì)都能得到較好的分離,分析時(shí)間適中。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定
1.苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜混合標(biāo)準(zhǔn)使用液的配制
分別吸取苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(濃度為1.0mg/mL,由國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心購買)0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL于10mL容量瓶中,加水至刻度,即得含苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液系列。用0.45μm水相微孔濾膜過濾,待測(cè)。
2.高效液相色譜條件
色譜柱:Agilent C18液相色譜柱;流動(dòng)相:乙腈:甲醇:0.01mol/L乙酸銨為4:3:93;流速:1.0mL/min;柱溫:30℃,進(jìn)樣量:10μL;檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器,波長205nm。按以上色譜條件將六種物質(zhì)的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液進(jìn)行色譜分析,以保留時(shí)間定性,峰面積外標(biāo)法定量。
1、檢測(cè)行業(yè)全覆蓋,滿足不同的檢測(cè);
2、實(shí)驗(yàn)室全覆蓋,就近分配本地化檢測(cè);
3、工程師一對(duì)一服務(wù),讓檢測(cè)更精準(zhǔn);
4、免費(fèi)初檢,初檢不收取檢測(cè)費(fèi)用;
5、自助下單 快遞免費(fèi)上門取樣;
6、周期短,費(fèi)用低,服務(wù)周到;
7、擁有CMA、CNAS、CAL等權(quán)威資質(zhì);
8、檢測(cè)報(bào)告權(quán)威有效、中國通用;
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