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Ames試驗(yàn)

作者:百檢網(wǎng) 時(shí)間:2021-10-21 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng)

??? ? ? ?三項(xiàng)遺傳毒性實(shí)驗(yàn)——細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)()、微核試驗(yàn)、染色體畸變

??? ? ? ?基因毒性是指能直接或間接殺傷細(xì)胞DNA的性質(zhì)。如香煙煙霧中的苯并芘具有基因毒性(genotoxic)。這種物質(zhì)可致突變,可使原癌基因(proto-oncogenes)和腫瘤抑制基因(genes)發(fā)生改變。

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??網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容顯示有限,如無(wú)您需要的項(xiàng)目,請(qǐng)電話(huà)咨詢(xún)公司相關(guān)人員? ? ?聯(lián)系方式: 15201733840

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??應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)
??ISO 10993-3
??GB/T 16886.3?
??OCED471?
??OECD473?
??OECD474?
??OECD476

??Ames實(shí)驗(yàn)
??中文名稱(chēng):鼠傷寒沙門(mén)氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

??? ? ? ?實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮希?/span>
??? ? ? ?鼠傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella typhimurium)的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型(his-)菌株,在含微量組氨酸的培養(yǎng)基中,除*少數(shù)自發(fā)回復(fù)突變的細(xì)胞外,一般只能分裂幾次,形成在顯微鏡下才能見(jiàn)到的微菌落。受誘變劑作用后,大量細(xì)胞發(fā)生回復(fù)突變,自行合成組氨酸,發(fā)育成肉眼可見(jiàn)的菌落。某些化學(xué)物質(zhì)需經(jīng)代謝活化才有致變作用,在測(cè)試系統(tǒng)中加入哺乳動(dòng)物微粒體酶,可彌補(bǔ)體外試驗(yàn)缺乏代謝活化系統(tǒng)之不足。

??哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外基因突變?cè)囼?yàn)
??? ? ? ?實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮恚?/span>

??? ? ? ?TK基因的產(chǎn)物胸苷激酶在體內(nèi)催化從脫氧胸苷(TdR)生成胸苷酸(TMP)的反應(yīng)。在正常情況下,此反應(yīng)并非生命所必需,原因是體內(nèi)的TMP主要來(lái)自于脫氧尿嘧啶核苷酸(dUMP),即由胸苷酸合成酶催化的dUMP甲基化反應(yīng)生成TMP。但如在細(xì)胞培養(yǎng)物中加入胸苷類(lèi)似物(如三氟胸苷,即TFT——trifluorothymidine),則TFT在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸,進(jìn)而摻入DNA,造成致死性突變,故細(xì)胞不能存活。若TK基因發(fā)生突變,導(dǎo)致胸苷激酶缺陷,則TFT不能磷酸化,亦不能摻入DNA,故細(xì)胞在含有TFT的培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng),即表現(xiàn)出對(duì)TFT的抗性。根據(jù)突變集落形成數(shù),計(jì)算突變頻率,以判定受試物的致突變性。

??哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外染色體畸變?cè)囼?yàn)

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??? ? ? ?目的和原理:

????? ? ? 染色體畸變分為染色體結(jié)構(gòu)畸變和數(shù)目畸變,染色體結(jié)構(gòu)畸變又分為缺失、短片、互換等。
???? ? ? ??在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下,使培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞暴露于受試物中,用中期分裂相阻斷劑(如秋水仙素或秋水仙堿)處理,使細(xì)胞停止在中期分裂相,隨后收獲細(xì)胞,制片,染色,分析染色體畸變。
??小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)
??? ? ? ?實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮恚?/span>?
??? ? ? ?微核是在細(xì)胞的有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時(shí),仍然留在細(xì)胞質(zhì)中的染色單體或染色體的無(wú)著絲粒片段或環(huán)。它在末期以后,單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核,被包含在細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)而形成,由于比核小得多,故稱(chēng)微核。??

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??ICH推薦的標(biāo)準(zhǔn)遺傳毒性試驗(yàn)組合

??????? ? ?組合一

??a.細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

??b.體外染色體畸變?cè)囼?yàn)或體外微核試驗(yàn)或體外小鼠淋巴瘤tk試驗(yàn),這三個(gè)試驗(yàn)可以任選其中一個(gè)。

??c.體內(nèi)微核試驗(yàn)或體內(nèi)骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn);動(dòng)物給藥后取外周血淋巴細(xì)胞做細(xì)胞遺傳學(xué)分析也可接受,但不常用。

??組合二

??a.細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

??b.用兩種不同組織做體內(nèi)遺傳毒性評(píng)估,通常包含體內(nèi)微核試驗(yàn)和另一個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)。第二個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)通常選擇評(píng)估動(dòng)物肝臟DNA鏈斷裂。

??細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)是與致癌物百檢網(wǎng)*相關(guān)的體外試驗(yàn)。

??細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗(yàn)

????? ? ?用于百檢網(wǎng)DNA損傷引起的基因突變。通過(guò)百檢網(wǎng)受試物在測(cè)試菌株某些特殊構(gòu)建的突變體上引起突變的能力,即造成菌株從組氨酸/色氨酸依賴(lài)型向原養(yǎng)型突變,判斷受試物是否為致突變劑。

?????? ? ?試驗(yàn)需在加和不加s9代謝活化系統(tǒng)條件下同時(shí)進(jìn)行。

?????? ? ?※在培養(yǎng)細(xì)菌的瓊脂培養(yǎng)基中加入痕量的組氨酸或色氨酸,允許細(xì)菌前幾個(gè)小時(shí)生長(zhǎng),表現(xiàn)為背景菌苔。當(dāng)加入的組氨酸/色氨酸用盡后,只有發(fā)生了突變的細(xì)菌才可以繼續(xù)生長(zhǎng)成為肉眼可見(jiàn)的回復(fù)突變菌落。

??不同類(lèi)型的

??


毒理實(shí)驗(yàn)需要多少錢(qián)需要多久?
發(fā)光細(xì)菌法水質(zhì)急性毒性百檢網(wǎng)



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