作者:宋檢 時間:2022-12-13 來源:互聯(lián)網(wǎng)
12月18日,eLife雜志在線發(fā)表了中國科學(xué)院分子植物科學(xué)**創(chuàng)新中心/植物生理生態(tài)研究所張余研究組、趙國屏研究組,上??萍即髮W(xué)楊貝研究組和浙江大學(xué)馮鈺研究組合作的題為Crlactivatestranscriptionbystabilizingactiveconformationofthemasterstresstranscriptioninitiationfactor的研究論文,論文介紹了一種特殊的不依賴DNA相互作用而激活轉(zhuǎn)錄的分子機(jī)制。
轉(zhuǎn)錄調(diào)控是細(xì)菌應(yīng)對環(huán)境脅迫、病原菌緩解抗生素壓力的重要手段。轉(zhuǎn)錄調(diào)控由細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄核心機(jī)器RNA聚合酶和一整套轉(zhuǎn)錄起始σ因子共同完成。細(xì)菌看家σ因子(如大腸桿菌的σ70)負(fù)責(zé)大多數(shù)的基因表達(dá),而在環(huán)境脅迫下,σS則占據(jù)主導(dǎo)。Crl是協(xié)助σS實現(xiàn)基因表達(dá)程序快速轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵蛋白,然而其轉(zhuǎn)錄激活分子機(jī)制尚不清楚。
該研究解析了E.coliCrl轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合物的3.8埃的冷凍電鏡結(jié)構(gòu)。該復(fù)合物包括了E.coli的RNA聚合酶、轉(zhuǎn)錄起始因子σS、Crl以及啟動子DNA。在該結(jié)構(gòu)中,Crl與σS的domain2相互作用,同時還與RNA聚合酶的*大亞基β’相互作用。不同于傳統(tǒng)的絕大多數(shù)轉(zhuǎn)錄激活因子,電鏡結(jié)構(gòu)顯示Crl不結(jié)合啟動子DNA,因此從結(jié)構(gòu)本身很難解釋Crl對于σS-RNAP的轉(zhuǎn)錄促進(jìn)活性。隨后,該研究利用氫氘交換質(zhì)譜(HDX-MS)的方法,發(fā)現(xiàn)在溶液狀態(tài)下,Crl結(jié)合到σS之后,能夠穩(wěn)定σS的多個結(jié)構(gòu)單元,而這些結(jié)構(gòu)單元直接參與了σS與RNA聚合酶以及σS與DNA的相互作用。基于以上數(shù)據(jù),作者提出了Crl特異性結(jié)合轉(zhuǎn)錄起始因子σS,穩(wěn)定σS的活性構(gòu)象,從而促進(jìn)σS與RNA聚合酶的組裝以及σS與啟動子DNA的結(jié)合,進(jìn)而激活σS-RNAP介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄。該工作呈現(xiàn)了一種新的轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶的結(jié)合方式,揭示了一種新的細(xì)菌轉(zhuǎn)錄激活分子機(jī)制。
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