作者:百檢網 時間:2021-11-02 來源:互聯網
食物中的蛋白質是食品檢測的主要項目,很多人可能會好奇,實驗室是如何測定蛋白質的含量的呢?今天就帶大家來了解一下。
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一般來說,不同含量蛋白質測定方法是一樣。
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步驟一:將樣品和硫酸放一起加熱,利用硫酸脫水性去除樣品水分,并破壞有機物。有機物中的C、H反應生成二氧化碳和水蒸氣逸出。
也可以選擇在過程中加入硫酸鉀,與硫酸反應生成硫酸氫鉀,從而達到提高溶液沸點的目的。溫度升高,則可以加速反應進程。同樣道理,加入硫酸鈉、氰化鉀鹽類也可以達到相同目的。但必須強調的是,必須控制好用量,否則溫度太高,會導致生成的硫酸氫銨被分解,放出氨而影響實驗結果。
此外,加入硫酸銅、陽化工或硒粉作為催化劑以及加入少量過氧化氫、次氯酸鈉作為氧化劑,也能加速反應進行。
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步驟二:蒸餾。蒸餾令硫酸銨在堿性條件下釋放氨,但需要注意,加入氫氧化鈉溶液要過量,還有就是防止溶液中氨氣逸出。
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步驟三:蒸餾過程中釋放的氨,可以用一定量的標準硫酸或標準鹽酸溶液進行氨的吸收,然后再用標準氫氧化鈉溶液反滴定過剩的硫酸或鹽酸溶液,從而計算出總氮量。
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半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收后,再用標準鹽酸滴定,硼酸呈微弱酸性,用酸滴定不影響指示劑標色反應,它還有吸收氨的作用。
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基本過程就如上述內容,但在檢測過程中,還有一些細節需要留意。畢竟實驗是嚴謹的,微小的細節失誤,都會導致實驗結果偏離真值。
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1、樣品應該是均勻的,如果是固體樣品,應事先研磨成粉末狀或細塊,確保樣品能和溶液均勻混合。
2、樣品放進燒杯時,注意別黏附在杯壁,以免造成檢測結果偏低。
3、硫酸和硫酸鉀的添加含量必須嚴格控制,否則溫度過高或過低都會影響反應。一般來說1克樣品,硫酸鉀與硫酸的比例分別是7克比12毫升。
4、樣品稱樣量并非**,根據蛋白質含量可以適當增加或減少。
5、加熱過程宜用小火,保持緩慢沸騰,火力集中在燒瓶底部。溫度升高過程不應太快,否則突然高溫容易造成樣品飛濺,既不安全,也影響檢測結果。
6、混合指示劑在堿性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色,如果沒有溴甲酚綠,可單獨使用0.1%甲醛紅乙醇溶液。
7、試驗完成后,要對試驗儀器進行清洗,并定期保養。
8、實驗過程涉及強酸強堿操作,應做好保護措施,以免發生危險。
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任何實驗都是嚴謹規范的,如果不能掌控整個流程細節,做出來的實驗數據就不具備參考價值。百檢網GB5009.5-2016食品蛋白質測定、
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