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NY/T 1842-2010 人參皂苷的測定 檢測標準

作者:百檢網 時間:2021-11-15 來源:互聯網

1 范圍

本標準規定了測定人參中9種人參皂苷的高效液相色譜方法。

本標準適用于人參中人參皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2和Rf的測定。

2 規范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本適用于本標準。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T 15517.1 模壓紅參分等質量標準

3 原理

試樣經乙醚脫脂后,用甲醇索氏提取提取后的樣液用SPEC8柱凈化,利用高效液相色譜儀(紫外檢測器)對試樣中的9種人參皂苷進行分離和測定,外標法定量。

4 試劑和材料

除非有說明,所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682 中規定的一級水。

4.1 70%乙醇溶液:取700mL無水乙醇,用去離子水稀釋至1000mL。

4.2 甲醇:色譜純。

4.3 乙醚。

4.4 人參皂苷標準品:Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、R(含量98%)。

4.5 標準混合溶液:逐一準確稱取0.183gRe、O.163gRg1、0.102gRf、O.102gRg2、0.255gRbl、0.306gRc、0.367gRb2、0.408gRb3、0.214gRd(精確至0.0001g)人參皂苷標準品,置于100mL容量瓶中,用甲醇定容,配制成質量濃度為1.8g/L、1.6g/L、1.0g/L、1.0g/L、2.5g/L、3.0g/L、3.6g/L、4.0g/L和2.1g/L的混合標準溶液,貯存在-18℃以下冰箱中,有效期6個月。

5 儀器

5.1 高效液相色譜儀:配有紫外檢測器

5.2 電子天平:感量為0.001g。

5.3 電子天平:感量為0.0001g。

5.4 旋轉蒸發儀。

5.5 索氏提取器。

5.6 控溫水浴。

5.7 循環水多用真空泵。

5.8 粉碎機。

5.9 樣品篩:孔徑0.25mm。

5.10 SPE C18小柱:1000mg填料,6mL。

5.11 微量進樣器:5HL~50μL。

6 試樣制備

按GB/T 15517.1-1995 中6.3的規定執行。

7 分析步驟

7.1 樣品提取

準確稱取人參干樣2g(精確至0.01g),加入100mL乙醚于索氏提取器中,提取1h,棄去乙醚,待殘渣中乙醚揮干后,再加入甲醇回餾8h。

7.2 樣品凈化

7.2.1 SPE C18 柱的預處理

先用20mL去離子水淋洗 SPE C18柱,然后用20mL的甲醇進行活化,再用20mL去離子水平衡。待水與柱篩板近平時上樣。

7.2.2 提取液的處理

提取液在60℃水浴條件下,經旋轉蒸發儀減壓濃縮至近干,氮氣吹干,加入4mL去離子水充分搖勻。取2mL注入預先活化好的SPE C18柱中,待液面與柱篩板近平時,倒入10mL去離子水淋洗SPE C18柱,棄去流岀液待淋洗液液面與柱篩板近平時,加亼25mL乙醇溶液(4.1)洗脫 SPE C18柱,收集洗脫液于50mL刻度試管中,氮氣吹至25mL以下,用甲醇定容至25mL,混勻后,用0.2μm濾膜過濾,待測。

7.3 測定

7.3.1 儀器參考條件

7.3.1.1 色譜柱:C18(4.6mm×300mm×0.5μm)或相當者。

7.3.1.2 流動相:甲醇十水。

7.3.1.3 柱溫:47℃。

7.3.1.4 流速:0.5mL/min~0.8mL/min。

7.3.1.5 檢測波長:202nm。

7.3.1.6 進樣量:10μL。

7.3.1.7 梯度洗脫程序見表1。

7.3.2 標準曲線的繪制

用混合皂苷標準工作液(4.5)按著梯度洗脫程序進行分析。準確吸取0mL、2mL、4nL、6mL、8mL、10mL混合皂苷標準溶液(4.5),分別置于10mL容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,準確吸取10μL各容量瓶中的標準溶液,分別注入液相色譜儀,記錄峰面積。以各皂苷進樣的質量濃度對其峰面積繪制標準曲線。

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