冰淇淋中磷酸酶怎么檢測?目前對于冰淇淋中磷酸酶有對應的檢測方法標準依據。今天百檢網就給大家介紹一下冰淇淋中磷酸酶的測定方法相關信息。

檢測步驟：

步驟1——分取1.0ml樣品放入2個或3個試管中(1個試管作為對照或空白，*好有兩個以上試管進行平行測定)(山羊奶用3ml樣品)。

步驟2——在沸水的帶蓋的燒杯中加熱空白約1min(整個試管溫度必須在85—95℃)，冷卻到室溫。逐個同樣處理空白和試樣。

步驟3——加10.0mlBa緩沖基質 (b)(1)或 (2)，塞緊試管，混合 (pH10.0±0.15)。(這個基質對鮮奶，甜脫脂酸奶或干酪乳漿是很滿意的。對于長時間或輕微發酸的牛奶，使用由未稀釋的緩沖溶液(a)(1)制備的基質;對于巧克力飲料，用由1/4體積水稀釋的緩沖液制備的基質;對于很酸(pH<4.5)的脫脂酸奶，由26—11緩沖液18-128A(a)(2)制備基質;而對于山羊奶，由27—11緩沖液A(a)(2)制備基質。

對未知樣品的定量結果，調節pH到l0.0—10.05。

步驟4——加入基質后，立即在37—38℃水浴上培養1h，不時地混合或搖動。

步驟5——在沸水燒杯中加熱約1min(試管中物質的溫度應達到85—90℃，在另一個同樣大小和形狀含有同樣體積液體的試管中用溫度計測定)。在冷水容器中冷卻到室溫。

步驟6——對于鮮奶，甜脫脂酸奶或干酪乳漿，移取1.0mlZn—Cu蛋白質沉淀劑(C)。(對于長時間的或輕微發酸的牛奶或酸化脫脂酸奶，以1.0m16.0%的ZnSO4·7H2O溶液代替;對巧克力飲料，用1.0ml含4.5gZnSO4·7H2O和0.1gCuSO4·5H2O/100ml溶液;而對山羊奶，用1.0m1含7.5gZnSO4·7H2O和0.1gCuSO4·5H2O/100ml的溶液)充分混合 (混合物的pH應為9.0—9.1)。

步驟7——過濾(5cm漏斗，9cmWhatman42號或2號濾紙，或相當的)并把5.0ml濾液收集在試管中，*好用刻度在5.0和10.0ml的試管。

步驟8——加5.0ml發色緩沖液 (a)(2)(混合物的pH應為9.3—9.4)。

步驟9——加4滴BQC溶液(d)混合，在室溫發色30min(對只檢驗不足的巴氏滅菌，僅加2滴BQC溶液)。

步驟10——用下列方法之一測定藍色的強度:

(a)用光度計——讀空白和試液的顏色強度(使用具有*大T的大約610nm的濾光片)，從試樣讀數中減去空白的讀數，參考標準曲線 (g)(2)，把結果轉化為酚當量。[使用光度計時，一般不必用BuOH萃取;如果按(b)中進行BuOH萃取，離心5min破壞乳膠體并除去懸浮在乙醇層中的水。(Babcock離心瓶對這個目的是適用的用如下制作專用的試管架:從適當直徑的橡膠塞上切下6mm厚，裝進離心杯的底部，把2個適當直徑的軟木塞粘在一起，通過中心打一個適當大小的洞，以便固定試管，把一對軟木塞插入杯中。)離心后，用頂部帶橡皮球的移液管，除去幾乎全部BuOH。滲入光度計池中，用具有*大T約650nm濾光片讀數]。

(b)用目視標準——對于產生大于5個顏色單位的樣品，將試管中的顏色與酚標準水溶液 (g)(2)的顏色比較。對于邊界情況的定量結果 (即試樣產生0.5—5顏色單位)，用BuOH(f)萃取。加5.0mlBuOH并慢慢顛倒試管幾次;如果必須提高乙醇層的清晰度，可按 (a)中離心，與經同樣處理的酚標準液 (g)(2)的顏色比較。

步驟11——發色中，觀察到強烈的陽性試驗中(即≥20單位)，用4滴BQC可能不足以與所有酚結合，移取適量部分到另一管中用稀發色緩沖液(a)(3)稀釋到10.0ml，再加2滴的BQC溶液。對于每個試驗都稀釋而且同樣處理空白。如果稀樣品試驗仍是很強的陽性，再用同樣方法稀釋直到*終顏色在目視標樣或光度標樣曲線范圍之內。在*后一次加入BQC后，進行*后讀數前，使其發色30min。為校正稀溶液的讀數，對于5+5稀溶液乘以2，對于1+9稀溶液乘以10，對于2+8稀釋后又1+9稀釋溶液乘以50，等等。

步驟12——用1.0ml樣品加11.0ml試劑(總液體12.0ml，用5.0ml濾液)時:用讀數值乘以1.2轉變為酚當量/0.5ml樣品。(如果愿意也可以乘2.4將結果變為酚當量/1ml樣品)在鮮奶、巧克力飲料、脫脂酸奶和奶酪乳漿中，酚當量大于2/0.5ml表明消毒不夠，山羊奶中酚量大于1/1.5ml表明消毒不足。

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