作者:小強 時間:2022-10-20 來源:互聯網
食品小腸結腸炎耶爾森氏菌怎么檢測?目前對于食品小腸結腸炎耶爾森氏菌有對應的檢測方法標準依據。今天百檢網就給大家介紹一下食品小腸結腸炎耶爾森氏菌的測定方法相關信息。
檢測方法標準依據:GB 4789.8-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗
1.范圍
本標準規定了食品中小腸結腸炎耶爾森氏菌( Yersinia enterocolitica)的檢驗方法。
本標準適用于食品中小腸結腸炎耶爾森氏菌的檢驗。
2.設備和材料
除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外,其他設備和材料如下:
2.1 冰箱:0℃~4℃
2.2 恒溫培養箱:26℃±1℃、36℃±1℃。
2.3 顯微鏡:10倍~100倍。
2.4 均質器。
2.5 天平:感量0.1g。
2.6 滅菌試管:16mm×160mm、15mm×100mm。
2.7 滅菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)。
2.8 錐形瓶:200mL、500mL
2.9 滅菌平皿:直徑90mm。
2.10 微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統。
3.培養基和試劑
3.1 改良磷酸鹽緩沖液:見A.1。
3.2 CIN-1培養基( Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar):見A.2。
3.3 改良Y培養基( Agar Y, Modified):見A.3。
3.4 改良克氏雙糖培養基:見A.4。
3.5 糖發酵管:見A.5。
3.6 鳥氨酸脫羧酶試驗培養基:見A.6。
3.7 半固體瓊脂:見A.7。
3.8 緩沖葡萄糖蛋白胨水[甲基紅(MR)和VP試驗用]:見A.8。
3.9 堿處理液:見A.9。
3.10 尿素培養基:見A.10。
3.11 營養瓊脂:見A.11。
3.12 小腸結腸炎耶爾森氏菌診斷血清。
4.檢驗程序
小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗程序見圖1
5.操作步驟
5.1 增菌
以無菌操作取25g(或25mL)樣品放人含有225mL改良磷酸鹽緩沖液增菌液的無菌均質杯或均質袋內,以8000r/min均質lmin或拍擊式均質器均質1min。液體樣品或粉末狀樣品,應振蕩混勻均質后于26℃±1℃增菌48h~η2h。增菌時間長短可根據對樣品污染程度的估計來確定。
5.2 堿處理
除乳與乳制品外,其他食品的增菌液0.5mL與堿處理液4.5mL充分混合15s。
5.3 分離
將乳與乳制品增菌液或經過堿處理的其他食品増菌液分別接種于CIN-Ⅰ瓊脂平板和改良Y瓊脂平板,26℃士1℃培養48h±2h。典型菌落在CIN-1上為深紅色中心,周圍具有無色透明圈(紅色牛眼狀菌落),菌落大小為Ⅰmm~2mm,在改良Y瓊脂平板上為無色透明、不黏稠的菌落。
5.4 改良克氏雙糖試驗
分別挑取5.3中的可疑菌落3個~5個,分別接種于改良克氏雙糖鐵瓊脂,接種時先在斜面劃線,再于底層穿刺,26℃±1℃培養24h,將斜面和底部皆變黃且不產氣的培養物做進一步的生化鑒定。
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