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超高效液相色譜三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用定性分析龜甲膠藥材

作者:百檢 時(shí)間:2022-11-28 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng)

檢測(cè)及試驗(yàn)方法

  分析條件

  液相條件

  色譜柱:Shim-pack XR-ODS III 2.0 mmI.D.×100 mm L., 2.2μm

  流動(dòng)相:A相-0.1%甲酸水溶液;B相-乙腈

  流速:0.3 mL/min

  柱溫:35℃

  進(jìn)樣量:5μL

  洗脫方式:梯度洗脫,B相初始濃度為5%,洗脫程序見(jiàn)表1。

  質(zhì)譜條件

  離子化模式:ESI,正離子模式

  離子噴霧電壓:+4.5 kV

  霧化氣流速:氮?dú)?.0 L/min

  干燥氣流速:氮?dú)?5 L/min

  碰撞氣:氬氣

  DL溫度:250℃

  加熱模塊溫度:400℃

  掃描模式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)

  駐留時(shí)間:100 ms

  延遲時(shí)間:3 ms

  MRM參數(shù):見(jiàn)表2

  對(duì)照品和樣品配制及前處理方法

  取對(duì)照藥材或待測(cè)樣品粉末0.1 g,加入1%碳酸氫銨溶液50 mL,超聲處理30 min,用微孔濾膜濾過(guò)。參照《中國(guó)藥典(2015版)》龜甲膠項(xiàng)下,取濾液100μL,置于進(jìn)樣瓶中,加入胰蛋白酶溶液10μL(用1%碳酸氫銨溶液配制成濃度為1 mg/mL的胰酶溶液),搖勻,37℃恒溫酶解12小時(shí),作為對(duì)照藥材溶液或供試液。

  結(jié)果與討論

    龜甲膠對(duì)照藥材的MRM色譜圖

  LCMS分析獲得龜甲膠對(duì)照藥材特征多肽的MRM色譜圖,保留時(shí)間10.85 min,圖1中兩對(duì)特征離子對(duì)631.40>546.20以及631.40>921.40的信噪比分別為127479和7451,充分滿(mǎn)足藥典中要求的色譜峰信噪比大于3:1的要求。

  實(shí)際樣品分析

  對(duì)兩種市售龜甲膠藥材樣品進(jìn)行分析,結(jié)果如圖2、3和表3所示。

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