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細(xì)胞增殖/毒性檢測服務(wù)

作者：banjian77 時(shí)間：2022-10-19 來源：互聯(lián)網(wǎng)

　　細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征，細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。通過分裂，可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去，是生物體生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。單細(xì)胞生物，以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的個(gè)體。多細(xì)胞生物，以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞，用來補(bǔ)充體內(nèi)衰老和死亡的細(xì)胞;同時(shí)，多細(xì)胞生物可以由一個(gè)受精卵，經(jīng)過細(xì)胞的分裂和分化，*終發(fā)育成一個(gè)新的多細(xì)胞個(gè)體。細(xì)胞增殖檢測可以指示腫瘤細(xì)胞增殖活性、目的基因瞬轉(zhuǎn)/穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系的細(xì)胞增殖活性，在小分子化合物/多肽等藥物篩選及功能安全性研究、中藥/中間體等藥物篩選及功能安全性研究、目的基因過表達(dá)的基因功能研究、目的基因RNAi干擾的基因功能研究中發(fā)揮重要作用。

　　細(xì)胞毒性是由合成化合物、細(xì)胞自然產(chǎn)生毒性或免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞(如細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞等)引起的單純細(xì)胞殺傷事件。同細(xì)胞凋亡及壞死不同，細(xì)胞毒性不是指某種特定的細(xì)胞死亡機(jī)制，不依賴于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機(jī)理。細(xì)胞毒性分析可以使用于基礎(chǔ)研究和藥物發(fā)現(xiàn)，以篩選有毒化合物庫。可產(chǎn)生細(xì)胞毒性反應(yīng)的化合物可在后續(xù)篩選中淘汰掉;或者將靶向快速分裂細(xì)胞的化合物選定為癌癥治療的候選化合物。

　　常用的細(xì)胞增殖/毒性檢測技術(shù)有很多，我們采用MTT，CCK-8兩種方式為客戶進(jìn)行細(xì)胞增殖與毒性檢測服務(wù)。

　　細(xì)胞增殖/毒性檢測服務(wù)—MTT法：

　　二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽 (MTT)，為淡黃色粉末，水溶性好。能被各種活細(xì)胞(除紅細(xì)胞外)攝取，在線粒體內(nèi)被脫氫酶還原，由黃色可溶性溶液轉(zhuǎn)變?yōu)椴豢扇苄缘淖仙着H(formazan)顆粒，用一定的裂解液裂解細(xì)胞并溶解甲臜，再通過測定溶液的吸光值就可以推測細(xì)胞的增殖程度。MTT法簡單快速、準(zhǔn)確，是在細(xì)胞毒性試驗(yàn)及細(xì)胞增殖等實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常使用的一種方法。

　　細(xì)胞增值/毒性檢測服務(wù)——CCK-8法：

　　CCK-8(Cell Counting kit-8)試劑中含有WST-8，其化學(xué)名為：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜染料(Formazan dye)。生成的甲臜物地?cái)?shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比，因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。

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