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嬰幼兒食品乳品離生物素檢測標準介紹

作者:小強 時間:2022-10-19 來源:互聯(lián)網(wǎng)

嬰幼兒食品乳品離生物素怎么檢測?目前對于嬰幼兒食品乳品離生物素有對應(yīng)的檢測方法標準依據(jù)。今天百檢網(wǎng)就給大家介紹一下嬰幼兒食品乳品離生物素的測定方法相關(guān)信息。

檢測方法標準依據(jù):GB 5413.19-2010 嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定

1.范圍

本標準規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定方法。

本標準適用于嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定規(guī)范性引用文件。

2.規(guī)范性引用文件

本標準中引用的文件對于本標準的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。

3.原理

利用植物乳桿菌(Lactobacillus plantarun)對游離生物素的特異性和靈敏性,定量測定出試樣中待測物質(zhì)的含量。在含有除待測物質(zhì)以外所有營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基中,微生物的生長與待測物質(zhì)含量呈線性關(guān)系,根據(jù)透光率與標準工作曲線進行比較,即可計算出試樣中待測物質(zhì)的含量。

4.試劑和材料

除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的二級水。

4.1 菌株:植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum),ATCC 8014。

4.2 生物素(d-Biotin或Vitamin H)標準品(C10H16N2O3S):純度≥99%。

4.3 培養(yǎng)基

4.3.1 乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基:見附錄A。

4.3.2 乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基:見附錄A。

4.3.3 生物素測定用培養(yǎng)基:見附錄A。

注:一些商品化合成培養(yǎng)基效果良好,商品化合成培養(yǎng)基按標簽說明進行配制。

4.4 乙醇溶液(50%)。

4.5 硫酸溶液(3%):量取3mL硫酸加入到水中,定容至100mL。

4.6 氫氧化鈉溶液(0.5mol/L):稱取20g氫氧化鈉溶于1000mL水中。

4.7 氯化鈉溶液(9g/L):稱取9.0g氯化鈉溶解于1000mL水中,分裝試管,每管10mL。121℃滅菌15min。

4.8 標準溶液的制備

4.8.1 生物素標準貯備液(100μg/mL):稱取生物素標準品(4.2)用乙醇溶液(4.4)定容至生物素濃度為100μg/mL,貯于冰箱中。

4.8.2 生物素標準中間液(lμg/mL):吸取1mL生物素標準貯備液(4.8.1),用乙醇溶液(44)定容至100mL。

4.8.3 生物素標準工作液(10ng/mL):吸取1mL生物素標準中間液(4.8.2),用乙醇溶液(4.4)定容至100mL。

4.8.4 標準曲線工作液

分兩個濃度,高濃度溶液的濃度為0.2ng/mL;低濃度溶液的濃度為0.lng/mL。從工作液中(4.8.3)吸取兩次各5mL,用水分別定容到250mL和500mL。

注:所有標準溶液要儲存于冰箱內(nèi)。4.8.1、4.8.2、和4.8.3保存期三個月,4.8.4臨用前配制。

5.儀器和設(shè)備

除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下:

5.1 天平:感量為0.1mg。

5.2 pH計:精度≤0.02。

5.3 分光光度計。

5.4 渦旋混合器。

5.5 離心機:轉(zhuǎn)速≥2000轉(zhuǎn)/分鐘。

5.6 恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃。

5.7 冰箱:2℃~5℃。

5.8 無菌吸管:10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器或吸頭。

5.9 瓶口分液器:0mL~10mL。

5.10 錐形瓶:200mL。

5.11 容量瓶(A類):100mL,250mL,500mL。

5.12 單刻度移液管(A類):容量5mL。

5.13 漏斗:直徑90mm。

5.14 定量濾紙:直徑90mm。

5.15 試管:18mm×180mm。

注:玻璃儀器使用前,用活性劑〔月桂磺酸鈉或家用洗滌劑加入到洗滌用水中即可)對硬玻璃測定管及其他必要的玻璃器皿進行清洗,清洗之后在200℃干熱2h。

………………

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