透明質酸鈉是一種天然直鏈多糖，由（1→4）-β-D葡萄糖醛酸和（1→3）-2-乙酞氨基-β-D-葡萄糖結合而成的雙糖結構單元所組成。根據透明質酸鈉結構單元的特性，對其進行深加工后制成的醫用透明質酸鈉凝膠是一種無種屬特異性、無毒、溶解性能好、生物相容性良好的新型生物材料，被廣泛用于多種眼科手術，用于防治外傷性或退變性骨關節炎，還可用于普通外科、婦產科等腹、盆腔手術預防術后腸粘連和盆腔粘連，及肌健、關節和神經手術預防組織粘連。

醫用透明質酸鈉凝膠作為一種植人體內的醫用生物材料必須嚴格控制各類雜質的含量，以確保產品使用的安全性和有效性。醫用透明質酸鈉凝膠在提純和干燥生產工藝中需要使用的乙醇很難完全揮發掉，微量乙醇的存在將使產品在使用過程中對患者產生不同程度的刺激反應，通?？芍绿弁矗⒂绊戧P節活動及其它許多器官系統的功能，故應嚴格控制乙醇的殘留量。筆者按YY0308–2004［1］要求，采用頂空氣相色譜法測定了醫用透明質酸鈉凝膠中的乙醇殘留量，依據JJFl059–1999［2］、CNAS–GL06［3］，對測量結果的不確定度進行了系統分析，找出影響的主要因素，并對各不確定度分量進行了評定和量化。

1實驗部分

1.1主要儀器與試劑

氣相色譜儀：PerkinElmerClarus680型，配有氫火焰離子化檢測器（FID），美國PE公司；頂空自動進樣器：PerkinElmerTurbomatrix40型，美國PE公司；20mL頂空瓶（帶聚四氟乙烯薄膜膠塞密封墊）；電子天平：MettlerAB104型，瑞士梅特勒公司；乙醇純度標準物質：99.8%，中國計量科學研究院；實驗用水為純化水。

1.2實驗條件

1.2.1氣相色譜分析條件

色譜柱：DB–1型（60m×0.32mm，0.5μm，美國安捷倫公司）；柱溫：50℃，保持2min，以10℃／min的速率升至160℃，保持5min；分流比：1∶2；進樣器、檢測器溫度：180℃。

1.2.2頂空分析條件

爐溫：80℃；進樣針溫度：100℃；傳輸線溫度：120℃；平衡時間：30min。

1.3實驗方法

乙醇標準貯備溶液的配制：取外部干燥的100mL量瓶，加入約30mL水，精密稱取乙醇純度標準物質0.1g于該容量瓶中，加水至刻度，搖勻。此溶液濃度為1mg／mL。乙醇標準溶液的配制：用1.0，2.0，3.0，5.0mL的單標線吸量管分別吸取乙醇標準貯備液1.0，2.0，3.0，5.0mL于10mL容量瓶中，加水定容，配制成濃度為100，200，300，400，500μg／mL的系列標準溶液。樣品制備：精密稱取1.0g樣品于20mL頂空瓶中，加入5.0mL水，壓蓋密封。分別將系列標準溶液與樣品溶液置于頂空進樣器上，按1.2實驗條件進行測定，記錄峰高，擬合標準曲線，并計算樣品中乙醇的含量。

2數學模型

乙醇殘留量測定結果按式(1)計算：

3測量不確定度來源

頂空氣相色譜法測定醫用透明質酸鈉凝膠中乙醇殘留量的不確定度主要來源：（1）乙醇純度標準物質引入的不確定度;（2）稱量引入的標準不確定度；

（3）標準溶液和樣品溶液配制過程中引入的不確定度；色譜測定過程引入的不確定度。

4測量不確定度各分量的評定

4.1乙醇純度標準物質引入的不確定度urel(c)

根據中國計量科學研究院提供的證書信息，乙醇純度的標準值為99.8%，擴展不確定度為0.3%(k=2)，則乙醇純度標準物質引入的標準不確定度為0.3%／2=1.5×10–3，相對標準不確定度：

4.2稱量引入的標準不確定度

（1）標準品稱量引入的不確定度：稱取量為0.1040g，根據天平檢定證書，其*大允許誤差為±0.5mg，按矩形分布考慮，則標準品稱量引入的相對不確定度：

（2）樣品稱量引入的不確定度：稱取量為1.0000g，根據天平檢定證書，其*大允許誤差為±0.5mg，按矩形分布考慮，則標準品稱量引入的相對不確定度為：

則稱量引入的相對標準不確定度：

4.3溶液配制過程中引入的不確定度

（1）玻璃量器校準引入的不確定度：配制標準溶液和樣品溶液所用的玻璃量器均有誤差［4］，按三角分布考慮，k=6估算標準溶液和樣品溶液配制過程使用的系列玻璃量器因校準引入的相對不確定度分量見表1。

（2）溫度變化引入的不確定度：實驗所用玻璃

量器已于20℃校準，水的膨脹系數為2.1×10–4／℃，假設實驗時溫度在±3℃之間波動，按矩形分布考慮，k=3，則體積變化引入的不確定度(mL)為(V×2.1×10–4×3)／3，結果見表1。由玻璃量器校準和溫度變化引入的相對標準

不確定度urel(V)：

4.4色譜測定引入的不確定度

（1）標準曲線方程的建立：以系列標準溶液的濃度為橫坐標，氣相色譜法所測得的峰高值為縱坐標擬合標準曲線，并據此建立標準曲線方程（標準曲線擬合數據見表2）。

（2）標準曲線的標準偏差即測定值和擬合值之間殘差的標準偏差s：

（4）重復測定和樣品的不均勻性引入的不確定。采用同批樣品平行取樣測定6次，乙醇殘留量為314.19，341.56，341.62，346.12，344.28，352.19μg／g，平均值為344.49μg／g，按A類不確定度評定，則相對標準不確定度urel(X)：

將上述兩項不確定度分量合成色譜測定引入的相對標準不確定度：

5合成標準不確定度及擴展不確定度相對標準不確定匯總見表3。

（2）合成標準不確定度。由上述幾項相對標準不確定度分量可求出合成相對標準不確定度：

（3）擴展不確定度。取包含因子k=2，則相對擴展不確定度：

樣品的稱量為m=1.0000g，樣品稀釋體積為5.0mL，從標準曲線方程計算得到測量樣品（2次）中乙醇的濃度平均值為c0=68.82μg／mL,樣品中乙醇的含量由(1)式計算得：

測量樣品中乙醇含量的擴展不確定度醫用透明質酸鈉凝膠中乙醇含量的測定結果表示為(344.10±37.51)μg／g，k=2。

6結語

通過對醫用透明質酸鈉凝膠中乙醇殘留量測量不確定度的評定，發現影響測量不確定度的主要因素是標準曲線擬合及重復測定和樣品的不均勻性。因此在測試樣品時應嚴格控制實驗條件，按照規范操作，并把儀器調整至*佳狀態，以保證測量結果的準確可靠。