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食品中甜味劑的檢測技術詳情

作者:宋檢 時間:2022-10-18 來源:互聯網

甜味劑分人工甜味劑和天然甜味劑。人工甜味劑(artificialsweeteners)是指具有甜味但不是糖類的合成化學物質,常見的人工合成甜味劑按結構分為磺胺類(甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜)、二肽類(阿斯巴甜、阿力甜、紐甜)、蔗糖衍生物(三氯蔗糖)3類。人工合成甜味劑甜度高,在人體內不進行代謝吸收、不提供熱量或因用量低而產生的熱量少,其不僅能夠賦予食品良好的口感,而且還可以取代蔗糖,作為糖尿病人和肥胖病人的替代品,加之又高效經濟,因而在食品飲料中被廣泛應用[1]。到目前為止,世界各國已獲批準的人工甜味劑有20種,其中得到多數國家批準使用的品種主要有安賽蜜、阿斯巴甜、甜蜜素、糖精、三氯蔗糖等[2]。然而科學研究表明,人工合成甜味劑能致使某些動物產生腫瘤,過量使用會影響人體健康,因此為避免其對人體產生潛在危險,美國、歐盟、日本等國對食品飲料中甜味劑的用量有嚴格規定[3]。糖精鈉不允許在嬰兒食品中使用。我國衛生部2011年發布的GB2760–2011《食品添加劑使用標準》中對人工甜味劑的加入量也有嚴格規定。檢測是保證食品質量安全的重要環節,筆者對近4年文獻報道的食品中甜味劑的檢測方法進行綜述。


1高效液相色譜法(HPLC)

武金忠等[4]建立了脫醇后用水稀釋、超高效液相色譜法–蒸發光散射檢測器(UPLC–ELSD)測定白酒中安賽蜜、甜蜜素、糖精鈉、阿斯巴甜、紐甜和甜菊糖苷6種甜味劑的方法,測定一個樣品僅需4min,方法的回收率達到89%~105%,相對標準偏差為4.6%。劉泰然等[5]采用對醬菜、果脯、口香糖加水或對酸奶加硫酸銨溶液等試樣處理,以乙腈–20mmol/L磷酸二氫鉀溶液為流動相梯度洗脫,用高效液相色譜法(HPLC)–紫外檢測器于波長210nm和230nm處測定食品中甜味劑(安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜)含量,相對標準偏差為2.0%~6.0%。嵇超等[6]采用對乳飲料乙腈沉淀蛋白進行試樣處理,以乙腈–20mmol/L磷酸二氫鈉水溶液為流動相梯度洗脫,超高效液相色譜法–紫外檢測器于波長為220nm測定飲料中4種甜味劑(安賽蜜、甜蜜素、糖精鈉、紐甜),檢出限為0.005mg/L。宋戈等[7]建立了經亞鐵氰化鉀和乙酸鋅處理沉淀、以甲醇–0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液為流動相梯度洗脫、高效液相色譜法–二*管陣列檢測器于230nm波長處檢測乳制品中甜味劑的方法,方法回收率為96.0%~103.5%,相對標準偏差為1.93%~2.76%。李小亭等[8]采用純水超聲提取、C18色譜柱分離,甲醇–水(體積比為43∶57)為流動相洗脫,高效液相色譜法–蒸發光散射檢測器檢測了飲料食品中安賽蜜、甜蜜素、三氯蔗糖和阿斯巴甜4種高倍甜味劑,用外標法定量,平均回收率在98.30%~99.00%之間,相對標準偏差小于1.63%。羅志剛等[9]采用純水稀釋,流動相采用梯度淋洗,高效液相色譜法–紫外檢測器于波長254nm處檢測飲料中的糖精鈉,回收率為93.3%~103.1%,相對標準偏差均小于4%,該法適用于不含蛋白質飲料中的甜味劑測定。張玉等[10]對無糖的餅干類采用固相萃取凈化或碳酸飲料超聲脫氣等處理,流動相梯度洗脫分離,用高效液相色譜–蒸發光散射檢測法測定安賽蜜、糖精鈉、甜蜜素、三氯蔗糖和阿斯巴甜的含量,平均回收率在87.0%~105.0%之間。肖立群等[11]通過對酒類脫醇、多色素樣品聚酰胺粉末去色素或低蛋白均質后乙酸–乙酸銨緩沖溶液超聲提取,采用5.0mmo1/L乙酸–乙酸銨緩沖溶液(pH6.0)和甲醇為流動相進行梯度洗脫,超高效液相色譜法–二*管陣列檢測器于波長235nm處測定食品中5種人工合成甜味劑安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜、甘素和紐甜含量,加標回收率在75.0%~104.0%之間,相對標準偏差在0.3%~7.2%之間。李薇等[12]采用乙腈–水稀釋,0.02mol/L磷酸二氫銨緩沖液(pH4.4)–乙腈為流動相線性梯度洗脫,高效液相色譜法–光電二*管陣列檢測器首次對鹽酸氨溴索口服溶液中4種甜味劑(安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜、甜菊糖/甜菊素)的含量進行檢測,并使用該方法在2011年度國家藥品質量評價性抽驗工作中對鹽酸氨溴索口服溶液中的4種甜味劑進行測定和評價。李家威等[13]采用60℃下500W微波用水提取樣品2min等處理,高效液相色譜法(HPLC)測定月餅中的安賽蜜和糖精鈉,并對比了微波提取和超聲提取的效果,加標回收率為96.0%~103.2%,方法適用于月餅類易成團樣品的常規理化檢測。王京京[14]利用12%乙酸鋅溶液和12%亞鐵氰化鉀溶液處理,甲醇–0.02mol/L乙酸銨溶液為流動相梯度淋洗,以高效液相色譜法–紫外檢測器于波長230,205nm處測定乳酸菌飲料中安賽蜜、阿斯巴甜、糖精鈉3種甜味劑,可在30min中完全分離,加標回收率為90%~102%,相對標準偏差為1.1%~4.3%。陳紅香等[15]采用亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液處理,20mmol/L乙酸銨–甲醇作為流動相,反相液相色譜法–二*管陣列檢測器測定糖品中的安賽蜜和糖精鈉,該方法的測定低限為1.0mg/L,加標回收率為89.85%~103.60%,相對標準偏差為1.50%~3.26%。楊春林等[16]以中性氧化鋁作為分散基體、甲醇–水超聲提取后,采用高效液相色譜–二*管陣列檢測器于波長220nm和230nm處測定糕點中安賽蜜和糖精鈉的含量,外標法定量,方法的平均回收率為89.5%~101.6%,相對標準偏差為0.98%~3.07%。周魁等[17]采用25%乙腈和75%緩沖劑稀釋、高效液相色譜–二*管陣列檢測器測定食品中紐甜含量的方法,回收率在95.96%~99.90%之間。項雷文等[18]利用氫氧化鈉去除脂肪,亞鐵氰化鉀和乙酸鋅去除沉淀,高效液相色譜–紫外檢測器于波長230nm處檢測玉米中的糖精鈉,檢出限為0.15μg/mL,平均加標回收率為94.86%。陳建等[19]采用石油醚、甲醇等提取,高效液相色譜–紫外檢測器于波長210nm和245nm處檢測糕點食品中甜菊糖苷、甜菊雙糖苷、甘草酸、甘草次酸4種天然甜味劑,外標法定量,回收率為80.0%~105%,相對標準偏差均小于7.5%。劉芳等[20]采用C18固相萃取小柱凈化,高效液相色譜–蒸發光散射檢測儀檢測果凍、饅頭等中安賽蜜、糖精鈉、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜5種甜味劑,平均回收率為85.6%~109.0%。蘇建國[21]對非發酵性豆制品熱水提取及發酵性豆制品純水提取,利用高效液相色譜–二*管陣列檢測器于波長236nm處測定其中安賽蜜和糖精鈉的含量,方法的平均回收率為97.5%~102.1%,相對標準偏差小于0.99%。丁怡等[22]采用GB/T5009.28–2003方法對酒類樣品進行前處理,采用離子對高效液相法–二*管陣列檢測器于波長230nm檢測測定其中的安賽蜜和糖精鈉,加標回收率分別為96.4%和99.8%,相對標準偏差分別為3.0%、2.5%。郎娜[23]采用甲醇–0.02mol/L乙酸銨溶液定容,高效液相色譜–二*管陣列檢測器于波長233nm處測定醬腌菜中安賽蜜和糖精鈉的含量,回收率分別為101.0%和99.1%,相對標準偏差小于0.86%。


2高效液相色譜–質譜法
丁芳林等[24]采用對果凍加水加熱或對西梅等甲醇超聲等試樣處理,高效液相色譜–質譜法(HPLC–MS)電噴霧負離子模式測定其中糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜和苯甲酸的含量,內標法定量,加標回收率為93.19%~100.90%,相對標準偏差為1.05%~2.04%。吳世嘉等[25]采用旋轉蒸發脫醇,超高壓液相色譜–質譜聯用法(UPLC–MS)電噴霧負離子模式檢測白酒中的安賽蜜、糖精鈉、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜、紐甜6種甜味劑,回收率在86.48%~116.90%之間。嵇超等[26]采用超聲脫氣,純水定容,高效液相色譜–串聯質譜法(HPLC–MS/MS)電噴霧負離子多反應監測(MRM)模式測定葡萄酒中安賽蜜、糖精鈉、甜蜜素、阿斯巴甜和紐甜5中甜味劑,回收率為87.2%~103.0%,相對標準偏差小于1.2%,適用于葡萄酒及其他復雜基質食品中低劑量、復合甜味劑的測定。郭瑩瑩等[27]建立了加水稀釋、高效液相色譜–串聯質譜檢測法(UPLC–MS/MS)多反應監測(MRM)模式定量分析白酒及調香劑中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜、阿斯巴甜的方法,方法的平均加標回收率為75.2%~115.3%,相對標準偏差在8%以內。劉曉霞等[28]對果汁加水稀釋或對固體樣品超聲提取等試樣處理,采用高效液相色譜–串聯質譜法(HPLC–MS/MS)電噴霧負離子多反應監測(MRM)模式測定食品中6種人工合成甜味劑(甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜、阿斯巴甜、阿力甜、紐甜),方法的平均回收率為81.3%~106.0%,相對標準偏差小于11%。ImmaFerrer等[29]采用SPE凈化,液相色譜–飛行時間質譜法(LC–TOF–MS)測定水和飲料中的阿斯巴甜、糖精、三氯蔗糖,優化了三氯蔗糖的誘導碰撞解離電壓并得到了詳細的特征質譜圖,并應用于廢水、地表水和地下水中三氯蔗糖的檢測。夏于林等[30]將白酒樣品過濾膜,采用液相色譜–串聯質譜法(LC–MS/MS)電噴霧負離子多反應監測(MRM)模式同時檢測其中的安賽蜜、甜蜜素、糖精鈉、阿斯巴甜,回收率在86%~106%之間,定量檢出限為5~12.5μg/L。尹峰等[31]對食醋進行酸性水稀釋,弱陰離子固相萃取凈化,建立了高效液相色譜–串聯質譜法(HPLC–MS/MS)反應監測(MRM)模式檢測其中糖精鈉、安賽蜜、甜蜜素的方法,方法的回收率為72.1%~96.8%,相對標準偏差小于15%。陳曉紅等[32]采用純水稀釋,超快速液相色譜–串聯質譜(UPLC–MS/MS)電噴霧負離子多反應監測(MRM)模式測定黃酒和葡萄酒中甜味劑,并研究了二級質譜特征,闡釋了其二級質譜裂解途徑。梁桂娟等[33]采用蒸餾水稀釋,超高效液相色譜–三重四*桿質譜聯用法(UPLC–MS/MS)電噴霧負離子多反應監測(MRM)模式檢測白酒中安賽蜜、糖精鈉、甜蜜素和三氯蔗糖4種甜味劑,加標回收率為82.0%~96.0%,相對標準偏差小于2.01%,該法適用于白酒中微量甜味劑的快速測定。孫棣等[34]利用純水稀釋,超高壓液相色譜–串聯質譜法(UPLC–MS/MS)電噴霧負離子多反應監測模式(MRM)檢測白酒中微量甜味劑(甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜),回收率在94.2%~111.5%之間。徐琴等[35]利用純水提取、C18色譜柱分離,建立了高效液相色譜–單級質譜法(HPLC–MS)電噴霧負離子模式檢測輸韓泡菜中甜蜜素含量的方法,平均加標回收率在82.0%~97.3%之間,相對標準偏差在2.59%~4.82%之間。


3氣相色譜法及其質譜聯用法(GC,GC–MS)

MahdiHashemi等[36]在酸性條件下使甜蜜素與亞硝酸,鹽衍生化生成環己烯,采用頂空單滴微萃取(HS–SDME)和氣相色譜(GC)–火焰離子化檢測器測定飲料中的甜蜜素的含量,在30~1000μmol/L范圍內線性系數為0.9992。段建發等[37]利用純水超聲提取、冰浴衍生化、氣相色譜–質譜法(GC–MS)對食品中的甜蜜素進行定性和定量分析,滿足食品實際檢驗需求。ShengbingYu等[38]在酸性條件下使甜蜜素和次氯酸鈉衍生化,利用氣相色譜–電子捕獲法(GC–ECD)測定食品和飲料中的甜蜜素,并成功用于測定黃酒、蛋糕、果汁、果脯中的甜蜜素。、


4其它檢測方法

Medeiro等[39]建立了同時測定飲料中阿斯巴甜和甜蜜素的方波伏安法,使用硼摻雜的碳電*,采用方波伏安法可以測定阿斯巴甜和甜蜜素,氧化峰電位之差達到400mV。YongnianNi等[40]在堿性溶液中用KMnO4氧化待分析物,采用紫外分光光度法測定食品中阿斯巴甜、糖精和安賽蜜。這3種甜味劑分別以不同的速度形成綠色的鉀–錳反應產物,使得選擇性測定每種甜味劑成為可能,為提高分析的準確性和精密度,使用了化學計量學的校正方法。MiguelACantarelli等[41]利用分子吸收分光光度法檢測食品中的阿斯巴甜和安賽蜜,從紫外檢測器得到的數據以化學計量學分析,其結果與高效液相色譜法(HPLC)得到的檢測結果無明顯差異。蔣奕修等[42]利用超聲去CO2后純水稀釋,高效毛細管電泳/電導法分離檢測飲料中3種磺胺類人工合成甜味劑(糖精鈉、安賽蜜、甜蜜素),檢出限分別為0.3,0.4,0.6μmoL/L。AnaBeatrizBergamo等[43]建立了毛細管電泳–電容耦合非接觸電導檢測法檢測軟飲和餐桌甜味劑中阿斯巴甜、甜蜜素、糖精和安賽蜜甜味劑的方法,回收率在94%~108%之間。YuWang等[44]建立了多克隆抗體–基于間接競爭酶聯免疫吸附法測定食品中糖精鈉的方法,其結果與高效液相色譜法得到的結果無顯著差異。GDPierini等[45]使用旋轉圓盤電*,采用多元校正模型和線性伏安法測定飲料中的安賽蜜和阿斯巴甜,并使用化學計量學的偏*小二乘法分析樣品含量,其結果與HPLC法得到的結果比較無顯著差異。


5結語

甜味劑因其甜度高、不產生能量、性能穩定等優點在食品工業中的應用越來越廣泛。從文獻可以看出,甜味劑的檢測方法主要為高效液相色譜法、液相色譜–質譜法、氣相色譜法等,而采用能夠準確定性的具有高分辨精確質量數的液相色譜–飛行時間質譜法(LC–TOF–MS)國內未見報道,國外也較少報道,是今后研究發展方向。

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